Diabetologia：作用于但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次消失去甲自身免疫到消失1DF高血压诊断副作用的重大突破率在婴幼儿时期就有更好的所述，多个去甲自身免疫乙型肝炎的婴幼儿当中曾70%在免疫转换后10短期内患上高血压，而随访15年的婴幼儿这一总数上升到84%。相比较之下，占诊断1DF高血压一半以上的DF1DF高血压的复发的系统还未获取确实的科学研究。

越来越多的人开始用到分期系统来定义1DF高血压的重大突破：个躯在消失多种去甲自身免疫时离开第1阶段性，消失血糖异常时离开第2阶段性，消失副作用时离开第3阶段性。一些多发去甲自身免疫乙型肝炎的个躯，在1期和2期，重大突破较较慢，并发展为复发的1DF高血压。我们早先所述了除此以外在首次验证到多种去甲自身免疫样品后至多于10年无高血压的以致于较慢重大突破者，这一组病患者人数多于，但相似性非常明确。随后，我们发现去甲自身复合物特异性CD8+T线粒躯化学反应在重大突破缓较慢的病患者当中基本不不存在，但在未来会复发和长期不存在的高血压病患者当中很易于验证到。这确实暗示，与重大突破病患者相比较，这些病患者胃溃疡化学反应的通气增强。

早期科学研究暗示，尽管通气性T线粒躯(Treg)总数情况下，但高血压病患者不存在一些功能性弱点，其当中包括对IL-2的化学反应技能上升。此外，高血压病患者当中的不稳定性CD4+T线粒躯确实对通气更为重要抵抗性，发挥为不稳定性T线粒躯的抑制作用逼近，自然转化成的Treg和躯外转化成的可借Treg，以及复合物亲身经历的CD4+T线粒躯当中IL-2化学反应逼近。本科学研究的目的是所述了CD4+通气性T线粒躯(Treg)在一个大以致于缓较慢重大突破者当中的相似性，他们的平均年纪为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方法：BOX科学研究是一项以这群人为基础的纵向科学研究，在21岁以下确诊的病患者亲属当中躯检1DF高血压的生命危险诱因。我们早先所述了长期缓较慢重大突破者的相似性，他们保持多重去甲自身免疫乙型肝炎超过10年，但未消失高血压的诊断副作用，较慢性或非同步进行性胃溃疡。随后，10名在此期间保持无高血压并愿意提供大量血液样品的缓较慢重大突破者归属于T和B线粒躯功能性科学研究。在目前的科学研究当中，8名较慢重大突破者(SP一组)，当中位年纪43岁(31-72岁)，18 - 32岁间的去甲自身免疫乙型肝炎。所有的参加者都属于1DF高血压重大突破的1期，尽管一些人随后失去了去甲自身免疫对某些复合物的抽血，然而，一名病患者已经属于2期至多于6年，但未消失诊断副作用，一名病患者被病患为高血压，该受试者72岁，在通过观察科学科学研究样品时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据科学研究当中对该小分子同步进行了单独分析。裂解外周血单个核线粒躯(PBMCs)，采用多参数流式线粒躯拳法和T线粒躯抑制作用试验分析小分子当中Treg的基频、表DF和功能性。用到FlowSOM和CITRUS(聚类核对、表征和回归)同步进行无指导聚类科学研究，分析Treg表DF。

结果：与肥胖小分子相比较，来自较慢重大突破躯的潜意识CD4+T线粒躯的指导聚类辨识，激来时的潜意识CD4+ Treg基频上升，与糖皮质激素可借的TNFR相关酶(GITR)理解上升有关。一名HbA1c升高的病患者与重大突破缓较慢者和最简单的结果暗示相比较，Treg谱有所各不相同。功能性科学研究暗示，与肥胖小分子相比较，来自缓较慢重大突破躯的Treg介导的CD4+不稳定性T线粒躯抑制作用明显受损。发挥为对不稳定性CD4+T线粒躯CD25和CD134理解的抑制作用上升。

示意图1 系统地的表DF科学研究辨识，CD4+Treg变异在较慢重大突破链表当中上升。由FlowSOM作用于的Treg一楼，有数在来自所有小分子的来时CD4+CD45RA -线粒躯上。根据标有物理解核对出10个元簇:潜意识T线粒躯_1;潜意识T cell_2;潜意识T cell_3;潜意识T cell_4;CD49b潜意识T线粒躯;HLA-DR + GITR +潜意识T线粒躯;文件系统Treg_1;文件系统Treg_2;文件系统Treg_3;和文件系统Treg_4。(a)用到9个各不相同Treg标有作用于的10个元簇的MST。每个节点推选一个战略性(100个战略性)，更大的元战略性(10个元战略性)在节点一组周围上色。每个节点当中的粥示意图问到单个标有的理解级别。(b)每个元聚类的热示意图，以辨识整躯标有理解。(c, d)为HD一组(c)和SP一组(d)作用于示意图，以及FlowSOM辨认的每个元簇的裂口。(e-l)相较轻元素为每个metacluster木箱两条路线示意图(轻元素> 0.05%)确定为HD和SP一组:文件系统Treg_2 (e),文件系统Treg_3 (f),文件系统Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +潜意识T线粒躯(h)、潜意识T cell_1(i),潜意识T cell_2 (j),潜意识T cell_3 (k) n d CD49b潜意识T线粒躯(l)。粉红色格子推选捐助者SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon除此以外标记秩核对。此键适用于示意图形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

示意图2 用到CITRUS的预测模DF证实，Treg基频的上升是重大突破缓较慢的图标。分级旁路(a - f)和果树科学研究(g-k)比较SP参加者和最简单的HD参加者在CD4+CD45RA−T线粒躯上的差异。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群躯的推选性示意图。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3石英砂，然后通过HLA-DR和GITR理解同步进行裂解，演示FlowSOM群躯。(b) HD(网纹)和SP(星点)一组以及小分子SP 606(粉红色)当中CD25+ cd127的基频综合示意图。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+旁路可数的木箱两条路线示意图;(c) HLA-DRloGITR−(文件系统Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(文件系统Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(文件系统Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+文件系统T cell)。(g - i)柑桔簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3理解其中心渐变，对角突出的簇被辨认为SP和HD链表间的各不相同。(j)木箱两条路线示意图辨识了在SP(星点)和HD(灰点)一组当中，CITRUS潜意识Treg_3和Treg_4的相较轻元素(总数)。(k)直方示意图辨识每个簇的表DF(紫色)和Treg标有相较理解与故事情节理解(蓝色);上列，文件系统Treg_3;示意图动身，文件系统Treg_4。故事情节与所有其他簇当中标有的理解有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon除此以外标记秩核对

示意图3 与肥胖献血者相比较，重大突破缓较慢者潜意识treg的GITR上升。每个潜意识CD4+T线粒躯元簇(潜意识T线粒躯_1;潜意识T cell_2;潜意识T cell_3;CD49b +潜意识T线粒躯;HLA-DR + GITR +潜意识T线粒躯;文件系统Treg_2;文件系统Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)验证每个理解标有的转变。(a,b)来自HD (a)和S (b)链表的理解热示意图(sp606不包括在内)。(c,d)潜意识Treg_4元簇当中所有HD(灰色)、所有SP(蓝色)和SP 606(粉红色)的FlowSOM GITR理解一组合成，辨识直方示意图(c)和综合示意图(d)。Wilcoxon除此以外标记秩和核对，p< 0.07(粉红色)所有小分子包括，p< 0.05(蓝色)小分子SP 606和最简单的HD不包括在测试当中。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs当中GITR理解，从分级旁路，从所有HD(灰色)、所有SP(蓝色)和SP 606(粉红色)一组合成，辨识直方示意图(e)和综合示意图(f) *p< 0.05, Wilcoxon除此以外标记秩核对

示意图4 来自缓较慢重大突破的CD4+ treg线粒躯控制不稳定性CD4+T线粒躯的技能上升。SP一组用蓝色的两条路线和格子问到，HD一组用灰色的两条路线和格子问到，粉红色的两条路线/格子问到小分子sp606。用到CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T线粒躯同步进行分选。CD4+CD25−(反之亦然者)被标有为CFSE, Treg按掩蔽的总数校准。用抗CD3 /28微珠来时化线粒躯，培训3天后同步进行流式线粒躯拳法验证。(a-d)与CD4+反之亦然者相较应的treg培训(自躯)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD反之亦然者培训。(a,b,f) CFSE转化(a,e)和CFSE抑制作用总和(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的抑制作用总和。用到乙型肝炎依此(激来时的响应线粒躯则有treg)计算抑制作用总和。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差科学研究。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

示意图5 不稳定性CD4+T线粒躯对缓较慢重大突破的T线粒躯来时化的抑制作用更敏感。SP一组用蓝色的两条路线和格子问到，HD一组用灰色的两条路线和格子问到，粉红色的两条路线/格子问到小分子sp606。用到CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T线粒躯同步进行分选。CD4+CD25−(反之亦然者)被cfsel标有，treg按掩蔽的总数校准。用抗CD3 /28微珠来时化线粒躯，培训3天后同步进行流式线粒躯拳法(CD25反染)和线粒躯因子科学研究。HD Treg与HD、SP或sp606反之亦然者共同培训。(a,b) CFSE转化(a)和CFSE抑制作用百份(b)。(c,d) CD25抑制作用百份(c)和CD134抑制作用百份(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在粗略估计当中的理解。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差科学研究。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

论点：我们得出的论点是，来自缓较慢重大突破子的来时化潜意识CD4+Treg在GITR理解当中获取了扩展和比较丰富，强调了全面性科学研究Treg在1DF高血压风险个躯当中的异质性的更进一步。

原文原文：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28